临床检验基础理论排泄物分泌物检验期末

参考教材:

人民卫生出版社《临床检验基础(第5版)》

粪便一般检验

粪便组成:

细菌(占干重的1/3)、消化道分泌物和有形成分、未消化的食物、食物分解产物

其中3/4是水,1/4是固体物质。

标本的采集与处理

1、容器

干净,标志明显,大小适宜,盛便后不漏不溢,不吸收水份,最好是一次性的塑料盒。

2、标本的要求

a、标本务必新鲜,不可混人尿液。

b、采集标本时应用干净竹签挑取粪便含有粘液或脓血部分,外观无异常的粪便应从不同部位浅、深处粪便多处取材;

c、一般检查留取少量粪便即可(至少有5克大小),稀便2ml,浓集卵时至少要取鸡蛋大小粪便,

3、及时检查

标本采集后应在1h内检查完毕,否则因pH及消化酶等影导致有形成分破坏。

4、特殊检查标本应按规定进行

检查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即送检,寒冷季节时标本送验及检查时应需保温。

粪便颜色:

健康成人粪便应为黄褐色,婴儿为金黄色。为粪胆素导致。各种生理性因素和病理性变化可以使其颜色发生变化。

①鲜红色:见于直肠癌、肛裂、痔疮等下消化道出血。

②黑色或柏油色:见于上消化道出血、服用铁剂、食用猪血等。红细胞破坏,血红蛋白在细菌作用下被分解,降解为血红素、铁、卟啉。铁与肠道分解生成的硫化氢形成黑色的硫化铁。

③白陶土色:见于阻塞性黄疸、胆道梗阻,食用脂肪过量、钡餐后。

④绿色:见于婴儿腹泻、由于肠蠕动过快,胆绿素由粪便排出而形成,或食用大量菠菜等。

⑤果酱色:见于阿米巴痢疾、细菌性痢疾等。

粪便性状:

健康成人为成形软便,便秘者为球形硬块。婴儿为糊状。

1、粘液便:正常粪便含有少量粘液,因与粪便均匀混合不易看见。粘液增多提示肠道炎症或受刺激,常见于各种肠炎、细菌性痢疾及阿米巴痢疾、急性血吸虫病等。小肠炎症时,增多的粘液均匀混合于粪便中;大肠炎症时,粪便已经逐渐形成而附着于粪便表面。

2、脓血便:见于细菌性痢疾、阿米巴痢疾、急性血吸虫病、溃疡性结肠炎或直肠癌。其中细菌性痢疾以脓及粘液为主,脓中带血;阿米巴痢疾以血为主,血中带脓,呈果酱样。

3、鲜血便:见于结肠癌、直肠息肉、肛裂及痔疮等。

4、柏油样便:呈褐色或黑色,质软、富有光泽,隐血试验阳性。见于上消化道出血,上消化道出血量超过50ml以上时,可见到柏油样便。

5、米泔样便:呈乳白色淘米水样,内含粘液片块,多见于霍乱、副霍乱。

6、溏便:粪便呈粥样但内含物粗糙,见于消化不良,慢性胃炎等。

7、胨状便:见于过敏性肠炎及慢性菌痢。病人常于腹部绞痛后排出粘胨状、膜状或纽带状粪便。

8、稀糊状或稀汁样便:见于各种感染性或非感染性腹泻,尤其是急性胃肠炎。若遇见大量黄绿色稀汁样便并伴有膜状物应考虑为假膜性肠炎。爱滋病并发隐孢子虫感染时也可排出大量稀汁样便。

9、乳凝块状便:粪便中有黄白色乳凝块或蛋花样便,见于消化不良,婴儿腹泻。

10、绿豆汤样便:见于沙门氏菌感染。

11、蛋青样便:白色念珠菌性肠道感染。

一、粪便的pH:

变化范围6.9-7.2。

细菌性痢疾、血吸虫病时碱性,8.0左右。阿米巴痢疾、病毒性肠炎为酸性,6.1~6.6左右。

二、粪便的量:

健康成人每日粪便为-g。

随食物种类、进食量和消化系统功能而变化。粗粮或纤维丰富的,粪便量多;细粮或肉类较多,粪便较少。

三、粪便的气味:

由于细菌作用的产物吲哚、硫化氢等等使得粪便有一定臭味。

消化吸收不良,胰腺疾病、消化道大出血时,为腐败臭味;脂肪或糖类消化不良,酸臭味;阿米巴痢疾时,鱼腥味。

粪便显微镜检查:手工盐水涂片镜检

取一清洁玻片,滴加2滴生理盐水,用竹签挑取粪便中的异常部份,与盐水均匀混合制成薄涂片,盖上盖片,其涂抹厚度以透过标本看清字迹为宜。

先用低倍观察虫卵、原虫和其它异物,再用高倍镜仔细观察各种异常成分。细胞计数时,至少应检查10个以上的高倍视野。

结晶:正常粪便中可见到磷酸钙、草酸钙、胆固醇、碳酸钙等结晶,一般无临床意义。

病理性结晶有:

①夏科-莱登结晶:为菱形无色透明结晶,其两端尖长,大小不等,折光性强,是嗜酸粒细胞破裂后嗜酸性颗粒相互融合而成。见于阿米巴痢疾、钩虫病、过敏性肠炎粪便中,并常与嗜酸性粒细胞同时存在。

②血晶:为棕黄色斜方形结晶,不溶于氢氧化钾溶液,溶于酸,呈青色,见于胃肠道出血粪便中。

③脂肪酸结晶:见于阻塞性黄疸引起脂肪酸吸收不良时。

粪便的脂肪检查

显微镜检查法、称量法和滴定法等

成人粪便总脂量(以总脂肪酸计算):2~5g/24h,或为干粪便的7.3%~27.6%;成人进食脂肪50~g/24h,排出量<7g,脂肪吸收率>95%。

当脂肪消化吸收能力减退时,粪便总脂肪量大量增加,若24h粪便总脂肪量超过6g,称脂肪泻。粪便脂肪增加可见于:

①胰腺疾病:慢性胰腺炎、胰腺癌等。

②肝胆疾病:胆汁淤积性黄疸、胆汁分泌不足、病毒性肝炎、肝硬化等。

③小肠病变:乳糜泻、Whipple病、蛋白丢失性胃肠病等。

④其他:胃、十二指肠瘘,消化性溃疡等。

粪便隐血:是指消化道出血量少(每日出血量<5ml),粪便中无可见的血液,且红细胞被消化破坏,显微镜下也见不到红细胞;这种肉眼及显微镜均不能证明,需用化学法、免疫法才能证实的微量出血,称为隐血。隐血试验(OBT)是指用化学或免疫学的方法证实微量血液的试验。

(一)化学法:这类方法种类很多,根据色原物质不同分为:邻联甲苯胺法、邻甲苯胺法、联苯胺法、无色孔雀绿法、愈创木酯法、还原酚酞法等;根据反应试剂状态或试剂载体不同又分为湿化学和干化学试纸法。其实验设计原理基本相同,此类方法简便易行,成本低廉,目前实验室常用。

1.原理:血红蛋白中的含铁血红素有类似过氧化物酶的作用,将供氢体(色原)中的氢转移给H2O2生成水,供氢体脱氢(氧化)后形成发色基团而呈色。呈色深浅可反映血红蛋白(出血量)的多少。

2.灵敏度:

①邻联甲苯胺、邻甲苯胺、还原酚酞法最灵敏,可检出0.2~1.0mg/L的血红蛋白,只要消化道有1~5ml出血就可检出。其中邻联甲苯胺法是在年中华医学会全国临床检验方法学学术讨论会推荐的方法,但易出现假阳性。

②中度灵敏的试验有联苯胺法、匹拉抗米酮法及无色孔雀绿法,可检出1~5mg/L的血红蛋白,消化道有5~10ml出血即为阳性。为了减少假阳性和假阴性,临床上宜采用中度灵敏方法。

(二)免疫学法:免疫学法常用的方法有ELISA和胶体金等方法,此类方法所使用的抗体为抗人血红蛋白单克隆抗体。免疫法操作简便、快速、灵敏度高(一般血红蛋白为0.2mg/L即可获阳性结果)、特异性强,饮食和药物等均对结果无影响,目前被认为是大肠癌普查最适用试验。

阴性

1、对消化道出血有诊断价值:消化道溃疡、药物致胃粘膜损伤、肠结核、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病、流行性出血热及消化道恶性肿瘤所致消化道出血时,隐血试验常呈阳性反应。

2、为消化道溃疡与肿瘤出血的鉴别提供依据:消化道肿瘤病人,由于肿瘤直接或间接侵犯、破坏消化器官中的血管,隐血试验呈持续性阳性;胃肠道溃疡病人仅在发病时有出血的表现,隐血试验结果呈间断性阳性。

3、可作为消化道恶性肿瘤普查的1个筛选指标:隐血试验对消化道肿瘤的诊断阳性率可达95%,其中早期胃癌诊断符合率为20%,晚期符合率达95%,对50岁以上的无症状者,每年做1次粪便隐血试验,对早期消化道恶性肿瘤有重要价值。早期大肠癌病灶仅限于粘膜层或粘膜下层时,往往无症状,粪便中带有微量的出血是早期诊断大肠癌唯一可查出的异常指标。

精液一般检验

精液主要由精子(5%)和精浆(精囊液、前列腺液、尿道球腺、旁腺液)组成。

(1)采集标本前要禁欲(包括无遗精或手淫)3-7天(30岁以下2-3天,30-40禁欲3-5天,40以上禁欲5-7天)

(2)要将精液全部排入洁净的干燥容器中。

(3)天冷时要注意保温,尽快送检(30-60min)

(1)评价生育功能,用于不育症的诊断的和疗效判断。

(2)辅助男性生殖系统的疾病诊断,如肿瘤、结核、先天发育不全等。

(3)计划生育的科研,输精管结扎后的疗效观察,术后6周精液内应无精子存在。

(4)为人工受精和精子库筛选优质精子.

(5)法医学鉴定。

精液的量

精液量为2.0~6.0ml,平均为3.5ml,少于1.5ml或大于8.0ml可视为异常。

无精液症:精液量减少至1~2滴,甚至排不出,称为无精液症。

精液的外观(颜色和透明度)

灰白色或乳白色,久未射精者可呈淡黄色,微浑浊,液化后半透明样。

①血性精液:精液呈鲜红色、淡红色、暗红色或酱油色,并含有大量红细胞者,称为血性精液。常见于前列腺和精囊的非特异性炎症、生殖系统结核、肿瘤、结石,也可见于生殖系统损伤等;

②脓性精液:呈黄色或棕色,常见于精囊炎、前列腺炎等。

精液的气味

正常精液具有栗花和石楠花的特殊气味,由前列腺液产生。

精液的粘稠度

刚排出的精液迅速凝成胶冻状,然后逐渐液化。正常精囊分泌的凝固蛋白使得精液凝固。

pH正常精液呈现弱碱性,为7.2-8.0。测定应在标本留取后1小时内完成。

精液的液化时间:精液由胶胨状态转变为流动状态所需的时间称为精液液化时间。精液液化主要是由于前列腺分泌的精液蛋白分解酶所致。

刚射出的精液具有高度的粘稠性,液化时间30min.。

精液延迟液化症:新鲜精液标本在室温下超过60min不液化,称为~,常见于前列腺炎。

精子活动率:指在显微镜下直接观察活动精子所占精子总数的比例。

1、湿片法:在高倍镜下观察个精子,计数活动精子与不活动精子的比例来表示精子活动率。该法简便、快速、应用广泛,但该法较主观,且影响因素多,结果误差较大,重复性较差。

2、活体染色法(也称为精子存活率):检测正常活动的精子数,是测定活精子和死精子的定量方法。用染料对精子染色。该法操作较为复杂,费时,但较客观反映死活精子比例,结果准确、可靠、重复性好,试剂易配制,易保存,是检测精子功能简便方法。

①湿片法:>70%(精液离体30~60min内)。

②伊红染色法:>75%(精液离体30~60min内)

精子活率检查主要用于男性不育症的诊断。正常精液排出后60min内,精子活动率为80%~90%,至少>60%,

曾认为精子数在60×10^9/L以上才能受孕,现认为只要有活动力的精子达45%,即使精子数<0.5×10^9/L,仍能受孕。

精子活动力:指精子向前运动的能力,是直接反映精子质量的一项指标。

WHO将活力分4级(教材上分为三级),用百分率表示。

a:快速前向运动,精子活动力良好

b:慢或呆滞的前向,精子活动力较好

c:非前向,在原地打转或抖动,精子活动力不良

d:不动,死精子

1、显微镜检查:取液化后精液1d于玻片上,在高倍镜下观察5-10个视野,计数个精子并进行活动分级用百分率来表示。

2、连续摄影法:将液化的精液直接充入记数池当中,在显微镜下倍视野下,调节精子浓度大约每视野10-15个,然后显微摄影,在同一张胶片上对同一个视野的精子进行6次暴光摄影,1s/次,可以得到精子的运动轨迹,死精子位置则始终不变。

3、精子质量分析仪测定:利用光束通过少量精液,检测精子运动带来的光密度变化。简单迅速,重复性好。

射精60min内,a级精子应>25%;或a和b级精子之和>50%。

精子活动力与受精的关系十分密切,若连续检查,精子活率不足40%,且以c级活动力精子为主,则可能为男性不育的原因之一。

精子活动力下降见于:①精索静脉曲张。②生殖系统非特异性感染以及使用某些药物(抗代谢药、抗疟药、雌激素)等。

精子计数

1、血细胞计数板检测;

2、Makler精子计数板检测:专门用于精子检验,池深为10um,不影响精子的正常运动,但是只使用于相差显微镜和暗视野显微镜;

3、Macro计数板检测:可以用于普通显微镜检测。

①精子浓度:(50~)×10^9/L;WHO:>20×10^9/L。②精子总数:≥40×10^6/次

一般认为<20×10^9/L为不正常,连续3次检查皆低下者可确定为少精症,多次未查到精子为无精症。

但临床上亦可见到精子浓度<20×10^9/L仍能生育,因此估计一个男性的生育能力应将精子浓度与精液其他参数结果综合考虑分析。

精子浓度减低见于:①先天性或后天性睾丸疾病如睾丸畸形、萎缩、结核、炎症、肿瘤等。②精索静脉曲张。③输精管阻塞、精囊缺陷。④重金属或放射线损害。⑤某些药物如抗癌药或长期服用棉酚。⑥50岁以上老年人等。

正常精子形态:

正常精子外形似蝌蚪状,由头、体(颈、中段)、尾(主、末段)构成。头部正面观呈卵圆形,侧面观呈扁平梨形,长约4.0~5.0μm,头部轮廓规则,顶体覆盖头部表面的1/3以上。体部轮廓直而规则,长约5~7μm。尾部细长,弯而不卷曲呈鞭毛状,长约50~60μm。

异常精子形态包括:

①头部异常:常见有大头、小头、锥形头、无定形头、空泡样头、双头、无顶体头等。

②体部异常:常见有体部肿胀、不规则、弯曲中段、异常薄中段。

③尾部异常:常见有无尾、短尾、长尾、双尾、卷尾等。

④联合缺陷体:精子头、体、尾均有或其中两者有不同程度异常。

检查方法

涂片染色:HE染色、Giemsa染色,相差显微镜检查

正常精液中异常精子数<20%。

精子形态检查是反映男性生育能力的1项重要指标。如正常形态精子30%,称为畸形精子症(WHO);

畸形精子40%,即会影响精液质量,50%常可致不育。精子形态异常与睾丸、附睾的功能异常密切相关,增多常见于生殖系统感染,精索静脉曲张,雄性激素水平异常时;某些化学因素、物理因素、药物因素、生物因素及遗传因素也可影响睾丸生精功能,导致畸形精子增多。

未成熟生殖细胞

是指各阶段发育不完全的生精细胞,包括精原、初级精母、次级精母和发育不完全的精子细胞。

正常精液未成熟生殖细胞<1%

根据生精细胞的类型可进一步衡量睾丸生精功能,分析睾丸病因,为无精症、少精症的病因分析提供科学依据。同时,动态观察精液生精细胞的变化,可作为男性不育症疗效观察和判断预后的指标之一。当睾丸曲张精管基膜异常,生精细胞发育障碍导致无精子症,精液中无生精细胞;当曲细精管的生精功能受到损害时,精液中可以出现较多的病理性幼稚细胞。

A.临床常见的睾丸不育原因是生精细胞成熟停滞,指精子生成过程在某个阶段停滞不前,精子生成突然停止,无精子症和少精子症。

B.许多药物可作用于睾丸,如硝基咪唑类药物主要抑制初级精母与早期精子细胞,但对静止期精母细胞不发生作用。棉酚主要作用于变态期精子细胞和中、晚期精母。

C.分析生精细胞,有利于分析病因和疗效判断。

D.生殖系统感染导致尖头精子和不定形精子以及精子细胞上升,精索、静脉曲张亦如此。

正常精液中有少量WBC(<5/HP)和上皮细胞,偶见RBC。

精液RBC、WBC增多可见于生殖系统炎症、结核、恶性肿瘤等。

精液中白细胞>1×10^9/L的病人称为白细胞精子症,表明存在感染,如精囊炎、前列腺炎、附睾炎等;红细胞增多见于肿瘤等。

精浆果糖:

由精囊产生,它是精子活动的主要能源,正常浓度9.11—17.67mmol/L

精浆中富含果糖,由精囊腺将血糖转化为分泌而来,是精子能量的主要来源,其含量高低直接影响精子的活力。

先天性精囊腺缺如,果糖为阴性;精囊腺炎时,果糖含量降低。在无精症和射精量少于1ml者,若精浆中无果糖为精囊阻塞;有果糖,则为单纯输精管阻塞。

精浆中ACP来自于前列腺,属前列腺酸性磷酸酶,含量明显高于其他体液。活性高低可以反映前列腺的功能。

测定方法有磷酸苯二钠和b-硝基酚比色法。

①精浆中的ACP测定有助于了解前列腺功能和前列腺疾病的诊断。如前列腺炎时酶活性下降,说明前列腺功能低下;前列腺肥大和前列腺癌时,酶活性升高。

②酸性磷酸酶有促进精子活动的作用,精浆中酸性磷酸酶活性减低,精子活动力减弱,可使受精率下降。

③精浆中的ACP明显高于其他任何体液,因此,ACP测定是法医鉴定有无精液最灵敏的指标。

精子顶体酶:

是一种蛋白水解酶,存在于精子顶体内,经常以无活性酶原形式存在,当精子头部进入卵细胞透明带时,才被激活,水解卵细胞透明带,使精子与卵子融合,在受精过程中起重要作用。

:48.2~.7μIU/10^-6

抗精子抗体(antispermatozoonantibody,AsAb)

当生殖系统炎症、阻塞、免疫系统遭到破坏等病理改变时,精子作为一种独特的抗原与机体免疫系统接触,产生自身或同种抗精子抗体(AsAb)。血液或生殖道分泌液中有AsAb,可引起免疫性不育。AsAb按其对精子作用分为凝集性、制动性和结合性3类。

精浆免疫球蛋白:

主要是IgA、IgG,相当于血清中的1%~2%。精浆中的IgG由血清渗透于前列腺而来,精浆中的IgA主要来自前列腺。

①IgG:28.6±16.7mg/L。②IgA:90.3±57.7mg/L。③IgM:2.3±1.9mg/L。

AsAb阳性者,IgG、IgM增高;正常人精浆中分泌性IgA含量很低,生殖道炎症时,分泌性IgA增高;生殖道感染早期IgM增高。

精浆免疫抑制物(seminalplasmaimmunoinhibitionmaterial,SPIM)

是存在于男性精浆中,对生殖生理有直接影响的一类蛋白质,能吸附于精子表面,干扰、抑制机体对精子的免疫反应。

人类精液中含有30多种抗原,但当精液通过男性生殖道和精液进入女性生殖道后通常不会引起免疫反应,研究显示SPIM起到了非常重要的作用。

SIPM的免疫抑制效应可能是多种物质结合作用的结果,包括妊娠相关蛋白A亦称男性抑制物质(MIM)、锌复合物、精胺和精脒等物质。

SPIM和MIM活性减低与不育(孕)、习惯性流产、配偶对丈夫精液过敏发生密切相关。近来研究发现SPIM与HIV及生殖道肿瘤的发生密切相关。

阴道分泌物一般检验

阴道分泌物:是女性生殖道分泌的液体,主要由宫颈腺体、前庭大腺、子宫内膜及阴道粘膜的分泌物混合而成,俗称“白带”。

阴道分泌物一般由妇产科医务人员采集,根据不同检查目的可从不同部位取材,一般采用消毒棉拭子自阴道深部或阴道穹后部、宫颈管处取材,用生理盐水涂片。

取材前24h内,禁止性交、盆浴、阴道灌洗和局部用药等,不可使用润滑剂。

一般性状

正常阴道分泌物为白色、絮状、带有粘性的液体,无气味,量多少不等,性状与雌激素水平及生殖器充血情况有关。1、临近排卵期量多,清澈透明、稀薄似蛋清;2、排卵2~3d后量减少,混浊粘稠;3、行经前量又增加;妊娠期,白带量较多。

①脓性白带:黄色或黄绿色,味臭,见于滴虫或化脓性细菌感染。泡沫状脓性白带常见于滴虫性阴道炎。

②豆腐渣样白带:稠厚豆腐渣样或凝乳状小碎块,常见于真菌性阴道炎,病人常伴有外阴瘙痒。

③血性白带:白带内混有血液,有特殊臭味。可见于宫颈息肉、子宫粘膜下肿瘤、老年性阴道炎、慢性宫颈炎、宫颈癌(常有特殊臭味)等。

④黄色水样白带:常见于病变组织变性坏死所致,如子宫粘膜下肌瘤,宫颈癌、宫体癌及输卵管癌等。

⑤奶油状白带:见于阴道加德纳菌感染。

清洁度检查

检查方法有湿片法及涂片染色法。湿片法简便、快速,临床常用,但对细菌观察结果较差。涂片染色检查,对细胞结构和细菌观察清楚,结果准确客观,但较复杂、费时、少用。

I~II度。

阴道分泌物清洁度是阴道炎症和生育期妇女卵巢性腺分泌功能的判断指标。

III~IV度为异常,多见于阴道炎,常可同时发现病原体。单纯清洁度异常而未发现病原体时,为非特殊性阴道炎;卵巢功能不足,雌激素水平减低时,阴道上皮细胞增生较差,糖原减少,阴道杆菌减少,易感染杂菌,导致阴道不清洁,如行经前及绝经后。

阴道毛滴虫:是寄生在女性阴道以及尿道和男性尿道和前列腺等部的鞭毛虫。

湿片法、涂片染色法、胶乳凝集试验及体外培养法等。

湿片法简便易行,快速,为临床实验室常用方法,不足之处是受送检时间、温度、涂片厚度及检验者水平影响,阳性率较低。

涂片染色检查能用油镜观察虫体结构,可提高检出率。但受涂片及染色等多种因素影响,如虫体可不典型,大小悬殊,要求检验者经验丰富。

乳胶凝集试验有试剂盒供应,操作简便、快速、灵敏度和特异性高,优于湿片法和培养法,适用于临床常规应用,但阴道分泌物为粘性时可出现非特异性反应。

培养法阳性率高,但操作复杂,主要用于症状较轻带虫者或慢性病人的检查以及作为诊断和治疗观察的依据。

阴道加德纳菌(GV)

正常情况下阴道内不见或见少许,检查乳酸杆菌和加德纳菌可作为细菌性阴道炎诊断的参考。正常情况下乳酸杆菌为6~30或30个以上/HPF。

1、非细菌性阴道病:乳酸杆菌>5个/HPF,仅见少许阴道加德纳菌。

2、细菌性阴道炎:乳酸杆菌<5个/HPF或无,但阴道加德纳菌、其他细小的G+/G-细菌大量增多。

线索细胞:是诊断加德纳菌阴道炎的重要指标之一。其主要特征:阴道鳞状上皮细胞粘附了大量加德纳菌及其他短小杆菌,形成巨大的细胞团,上皮细胞表面毛糙,有斑点和大量细小颗粒。

以后,在







































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